Este trabalho teve como objetivo avaliar o crescimento e a produção de delta-endotoxinas, esporos e proteases por Bacillus thuringiensis var. berliner, utilizando substratos agroindustriais de palma forrageira (Opuntia), xarope de sorgo (Sorghum) ou soro de leite, com ou sem suplementação de ureia 1 g/L. Luria-Bertani foi utilizado como meio de cultura controle. Culturas de B. thuringiensis foram cultivadas em frascos Erlenmeyer incubados em agitador rotativo a 200 rpm, 30 °C por 96 horas. O maior crescimento celular (4,28 g/L), produção de delta-endotoxinas (568,26 mg/L) e esporos (9,61 x 10¹⁰ UFC/mL), superiores inclusive ao meio de controle, foram observados ao se utilizar o soro de leite sem ureia. Não verificou-se relação direta entre a esporulação e a produção de delta-endotoxinas pelo Btb370 nos meios de cultura, como também entre a produção de proteases e de delta-endotoxinas. A suplementação com ureia 1 g/L foi viável para o substrato palma forrageira na atividade proteásica e para o xarope de sorgo em praticamente todas as análises, contudo não influenciou positivamente o soro de leite. Através de microscópio eletrônico de varredura, observou-se a predominância de cristais com morfologias bipiramidal, esférica e cuboidal. Portanto, os resultados sugerem o soro de leite como substrato mais eficiente para novas formulações de meios de cultura para produção de delta-endotoxinas por Bacillus thuringiensis var. berliner, superando os resultados do meio padrão Luria-Bertani.